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人激素脫落酸(ABA)ELISA試劑盒說明
關(guān)于人激素脫落酸(ABA)ELISA試劑盒,這是一種用于檢測人樣本中脫落酸(ABA)含量的酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)試劑盒。ELISA是一種高度靈敏的檢測技術(shù),廣泛應用于各種生物化學和分子生物學實驗中,尤其是用于檢測蛋白質(zhì)、激素和其它生物分子。
實驗原理
ELISA技術(shù)的原理基于抗原-抗體反應的特異性。在ELISA檢測中,通常使用預先固定在微孔板上的抗體(稱為包被抗體)來捕獲待檢測的分子(抗原)。然后,加入特異性識別該抗原的酶標記抗體。在溫育后,通過洗滌去除未結(jié)合的抗體。之后加入底物,酶標記抗體將會與底物反應產(chǎn)生可測量的信號(通常是顏色變化)。這個信號的強度與樣品中原始抗原的量成正比,通過測量這個信號,我們就可以準確地定量樣品中的抗原。
樣本處理
對于人激素脫落酸(ABA)ELISA試劑盒,樣本處理步驟可能包括:
血液樣本:通常需要將血液樣本離心,分離出上清液,也就是血清或血漿,用于檢測。
尿液樣本:同樣需要離心,取上清液。
細胞培養(yǎng)上清:需要離心并取上清液,可能還需要通過凍融循環(huán)來釋放細胞內(nèi)的ABA。
組織樣本:需要將組織研磨成勻漿,并取上清液用于檢測。
操作步驟
平衡和準備:從包裝中取出微孔板,平衡至室溫。
設(shè)置標準曲線:在微孔板中加入不同濃度的標準品。
加樣:向微孔中加入待測樣本和樣本稀釋液。
加入酶標記抗體:向每個孔中加入標記有辣根過氧化物酶(HRP)的檢測抗體。
溫育:將微孔板封住,放在37℃下溫育一定時間。
洗滌:去除未結(jié)合的抗體,通常需要多次洗滌。
加底物:向每個孔中加入底物溶液。
顯色和測量:在特定波長下(通常是450nm)測量吸光度(OD值)。
注意事項
操作過程中避免任何細胞刺激,使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。
尿液、細胞培養(yǎng)上清和組織樣本需要特定的處理步驟,以確保有效提取ABA。
需要注意的是,一些試劑,如疊氮鈉,可能會抑制HRP活性,因此應避免使用。
樣本在收集后如不及時處理,應按一次用量分裝并凍存于-20℃,避免反復凍融。
試劑盒組成
試劑盒通常包括:
酶標包被板
標準品
酶標記抗體
底物溶液
洗滌液
說明書等
實驗原理
ELISA技術(shù)的原理基于抗原-抗體反應的特異性。在ELISA檢測中,通常使用預先固定在微孔板上的抗體(稱為包被抗體)來捕獲待檢測的分子(抗原)。然后,加入特異性識別該抗原的酶標記抗體。在溫育后,通過洗滌去除未結(jié)合的抗體。之后加入底物,酶標記抗體將會與底物反應產(chǎn)生可測量的信號(通常是顏色變化)。這個信號的強度與樣品中原始抗原的量成正比,通過測量這個信號,我們就可以準確地定量樣品中的抗原。
樣本處理
對于人激素脫落酸(ABA)ELISA試劑盒,樣本處理步驟可能包括:
血液樣本:通常需要將血液樣本離心,分離出上清液,也就是血清或血漿,用于檢測。
尿液樣本:同樣需要離心,取上清液。
細胞培養(yǎng)上清:需要離心并取上清液,可能還需要通過凍融循環(huán)來釋放細胞內(nèi)的ABA。
組織樣本:需要將組織研磨成勻漿,并取上清液用于檢測。
操作步驟
平衡和準備:從包裝中取出微孔板,平衡至室溫。
設(shè)置標準曲線:在微孔板中加入不同濃度的標準品。
加樣:向微孔中加入待測樣本和樣本稀釋液。
加入酶標記抗體:向每個孔中加入標記有辣根過氧化物酶(HRP)的檢測抗體。
溫育:將微孔板封住,放在37℃下溫育一定時間。
洗滌:去除未結(jié)合的抗體,通常需要多次洗滌。
加底物:向每個孔中加入底物溶液。
顯色和測量:在特定波長下(通常是450nm)測量吸光度(OD值)。
注意事項
操作過程中避免任何細胞刺激,使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。
尿液、細胞培養(yǎng)上清和組織樣本需要特定的處理步驟,以確保有效提取ABA。
需要注意的是,一些試劑,如疊氮鈉,可能會抑制HRP活性,因此應避免使用。
樣本在收集后如不及時處理,應按一次用量分裝并凍存于-20℃,避免反復凍融。
試劑盒組成
試劑盒通常包括:
酶標包被板
標準品
酶標記抗體
底物溶液
洗滌液
說明書等
ELISA是一項非常敏感的技術(shù),可以用來定量分析人激素脫落酸(ABA),對于研究ABA在人體內(nèi)的作用和疾病診斷等方面有重要意義。在使用過程中,操作者需嚴格遵循說明書指導,確保實驗結(jié)果的準確性和可靠性。
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